Conferencias de la Universidad Nacional de Córdoba, Congreso Internacional de Metalurgia y Materiales

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EVALUACIÓN DE CULTIVO CELULAR EN DISPOSITIVOS DE MICROFLUÍDICA PARA SU APLICACIÓN EN LA PRODUCCIÓN DE ANTICUERPOS MONOCLONALES
Ana Belén Peñaherrera, C. Payés, M. Sierra-Rodero, G. Rosero, C. Lasorsa, P. Karp, N. Bourguignon, B. Lerner, G. Helguera, M. Pérez

Última modificación: 21-09-2016

Resumen


Los dispositivos de microfluídica aplicados al cultivo celular permiten crecer células bajo condicionescontroladas apropiadas para la producción de proteínas recombinantes. Con el propósito de dilucidar lascondiciones óptimas para el cultivo de células capaces de expresar proteínas recombinantes en losmicrodispositivos se cultivaron células HEK-293T bajo diferentes condiciones experimentales. Las célulasse cultivaron en dispositivos de polimetilmetacrilato (PMMA) y polidimetilsiloxano (PDMS) en presencia oausencia del agente de adhesión celular poli-D-lisina. Se evaluaron diferentes geometrías y espesores asícomo también la influencia del flujo sobre el crecimiento y adhesión celular[1]. Los resultados muestran quela presencia de poli-D-lisina mejora la adhesión y viabilidad de las células tanto en flujo continuo comodiscontinuo[2]. Adicionalmente, la adhesión óptima de las células fue observada en las esquinas de losmicrocanales, así como también en los canales anchos y las cisternas posiblemente debido a la disminuciónen el estrés hidrodinámico en estas áreas. Los microdispositivos con diseño de cisternas se utilizaron comomodelo para estudiar la distribución de células infectadas con pseudovirus del virus de la estomatitisvesicular (VSV por sus siglas en inglés “vesicular stomatitis virus”) a través de la expresión de la proteínafluorescente verde (GFP por sus siglas en inglés “green fluorescent protein”). Estos resultados proveeninformación para la optimización de la arquitectura de los microcanales para cultivos de células adherentesa largo plazo que permitan utilizar los microdispositivos como bioreactores para la producción deanticuerpos monoclonales terapéuticos y la actividad biológica in vitro de fármacos.

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